納米乳作為一種新型的給藥遞送系統(tǒng),其制備工藝簡單,制劑質(zhì)量穩(wěn)定,具有一定的動力學和熱力學穩(wěn)定性,且所載藥物經(jīng)乳液包裹后一方面能其有效提高藥物的穩(wěn)定性,另一方面也能降低給藥的刺激性?納米乳可以增加難溶性藥物的溶解度,并且能實現(xiàn)同時對脂溶性藥物和水溶性藥物的增溶,尤其適用于成分復雜的中藥提取物復方制劑的開發(fā)?此外,納米乳作為經(jīng)皮給藥制劑的給藥載體,由于其粒徑小的特點,能增強藥物活性成分的經(jīng)皮擴散速率,吸收明顯加快?

本研究將簡介一種油水均難溶性物質(zhì),通過納米乳包裹形式增加載藥量,實現(xiàn)緩釋和靶向給藥的目的?

主要儀器:

Agilent1100型高效液相色譜儀(美國安捷倫公司);

NanoZS90型激光粒度散射儀和Zeta電位儀(英國馬爾文公司);

WST-NANO (微斯特科技(蘇州)有限公司

實驗方法與結(jié)果:

難溶藥物A納米乳的處方優(yōu)選采用單因素考察法,以乳劑的外觀?性狀?穩(wěn)定性和載藥能力等為指標對難溶藥物A納米乳的處方進行優(yōu)化? 

1. 注射用油的選擇

經(jīng)調(diào)研,難溶藥物A在大豆油中的溶解度較高,大豆油與其他表面活性劑的配伍可進一步增難溶藥物A的溶解度?《中國藥典》2005版中已收載了注射用大豆油的質(zhì)量標準,從安全性和實用性角度考慮,選擇注射用大豆油作為難溶藥物A水包油納米乳的油相?本實驗采用常用的脂肪乳的處方對大豆油的用量進行考察:注射用油,甘油2.25%,磷脂1.2%,泊洛沙姆2.0%?固定其他處方組成,以不同用量的大豆油制備乳劑進行考察?結(jié)果表明,在一定范圍內(nèi),隨著注射用油用量的增加,乳劑穩(wěn)定性隨之降低.當乳劑中油相低于5%時,較難形成均勻的分散體系?當乳劑油相用量高于30%時,乳劑粘度較大,不適于靜脈注射?因此本研究選擇乳劑中注射用大豆油的用量范圍為5~20%?

2. 乳化劑的選擇

目前靜脈注射乳劑較為常用的乳化劑有磷脂和泊洛沙姆,具有安全性好,乳化能力強的優(yōu)點.至今為止,以這兩種乳化劑制備得到的乳劑靜脈注射給藥后未發(fā)現(xiàn)有毒性和副作用的產(chǎn)生.本研究分別對處方中單用F68和磷脂以及二者合用的乳劑進行比較,結(jié)果表明處方中F68和磷脂合用可大大增強乳化效率?以大豆磷脂和卵磷脂制成的乳劑中前者的穩(wěn)定性更好,因此本研究采用大豆磷脂和F68為復合乳化劑制備納米乳,考慮到乳劑的安全性和穩(wěn)定性,本研究中大豆磷脂的用量不高于2%,F68的用量范圍在0.5~2%之間?

3. 輔助乳化劑的選擇

本研究對常用的油酸和膽固醇進行考察,結(jié)果表明,在乳劑中加入少量的油酸對乳劑的穩(wěn)定性影響不大,而增加油酸的用量反而引起乳劑的不穩(wěn)定?加入適量膽固醇后可改善乳劑的穩(wěn)定性,因此本研究以膽固醇與乳化劑合用制備乳劑,磷脂與膽固醇的比例在10:1~4:l之間?

4. 穩(wěn)定劑的選擇

考察4種生物相容性好的脂肪酸或脂肪酸酯作為穩(wěn)定劑對難溶藥物A水包油納米乳的影響,分別記為穩(wěn)定劑A?穩(wěn)定劑B?穩(wěn)定劑C和穩(wěn)定劑D?考察了制備的難易程度?載藥量和穩(wěn)定性?結(jié)果表明,穩(wěn)定劑A和穩(wěn)定劑B的熔點較高(~65℃),制備中對溫度的要求較為苛刻?且難溶藥物A在高于60"C的條件下易于分解失活,因此不適宜制備難溶藥物A水包油納米乳劑?穩(wěn)定劑C和穩(wěn)定劑D具有適宜的熔點(~55°C),易于制備?二者的載藥能力相似,但長期放置后以穩(wěn)定劑D制成的乳劑難溶藥物A較易析出?這可能是因為穩(wěn)定劑D可以水解生成不同的次級脂肪酸酯和游離脂肪酸等,從而體系中出現(xiàn)了許多化學性質(zhì)不一的物質(zhì),影響制劑的穩(wěn)定性?藥物穩(wěn)定劑的量對乳劑的穩(wěn)定性也有影響,穩(wěn)定劑用量較低,制劑載藥量增加不明顯?用量過多會引起乳劑的分層和藥物的析出?本研究采用穩(wěn)定劑c作為藥物穩(wěn)定劑,在處方中穩(wěn)定劑C:大豆油的比例在l:25~l:100范圍內(nèi)均可制成穩(wěn)定的水包油納米乳劑?

5. 難溶藥物A水包油納米乳制備工藝的優(yōu)化

以不同方法對上述處方的難溶藥物A水包油納米乳劑進行制備,結(jié)果表明,超聲法制備乳劑,小量時乳滴粒徑分布較均勻,但粒徑偏大,乳劑不穩(wěn)定，不同處理量情況，處理結(jié)果差異較大;磁力攪拌法得到的乳劑粒徑分布范圍較大，穩(wěn)定性很差;微通道乳化技術(shù)是一種新型的乳劑制備技術(shù),本研究將油相裝入注射器中注入到水相當中,模擬微通道乳化技術(shù)同時結(jié)合渦旋混合的方法來制備初乳?高壓均質(zhì)和微射流高壓乳勻法處理的乳劑均能達到較小的粒徑,但微射流均質(zhì)法制備的樣品pdi更小，長期放置結(jié)果表明,微射流高壓乳勻法制備得到的乳劑更為穩(wěn)定,因此本研究采用微孔注入法與渦旋混合的方式將油相加入水相中,經(jīng)過高速分散后以微射流高壓乳勻制備難溶藥物A水包油乳劑?

工藝參數(shù)優(yōu)化結(jié)果表明,在制備過程中,渦旋混合時間不應少于2min?考慮到難溶藥物A的自身性質(zhì),乳化溫度不應高于60°C.高速分散使用8000-12000rpm均可得到穩(wěn)定的初乳,轉(zhuǎn)速過高容易造成初乳泡沫過多,處理時間在1.3min為宜.微射流高壓均質(zhì)采用先低壓處理再高壓處理的方式易得到穩(wěn)定的制劑?本法采用低壓(5000psi)2個循環(huán)后高壓(10000psi)處理6個循環(huán)得到的乳劑粒徑小于200nm,分布范圍較窄,符合靜脈注射要求?

制備結(jié)果：制得的納米乳外觀為乳白色?無油花?玻璃瓶中無掛壁現(xiàn)象;用2.25%甘油水溶液適當稀釋后,難溶藥物A水包油納米乳有藍色乳光出現(xiàn)?取難溶藥物A納米乳3批,每批取樣3份,置于10mL離心管中,4000rpm離心'30min?結(jié)果未見分層現(xiàn)象?

難溶藥物A水包油納米乳粒徑測試結(jié)果報告

以注射用大豆油?大豆磷脂?膽固醇和穩(wěn)定劑C為油相,Poloxamerl88?甘油為水相,采用微射流技術(shù)制備難溶藥物A水包油納米乳?粒徑為152+_18nm(PDl0.078+_0.018),zeta電位為-33.28+2.07mV?pH值在7.18+_0.03之間,符合注射要求?難溶藥物A水包油納米乳劑藥物含量為2.98+_0.03mg/mL?